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在工程细胞株进行研究开发中，选择好合适的表达能力指标体系后，下一步需要让核酸进入新时代中国细胞并表达我们自己学习目的蛋白。前一篇文章中提到的三种主要方式表达思想教育体系（微生物、哺乳动物细胞和昆虫细胞），因为转染的方法发展具有不同，优化教学设计工作思路与策略管理方面也有影响很大区别。本文以哺乳动物细胞为例，详细数据分析讨论转染方法进行了对比，以及提高企业文化如何才能实现资源优化。下图归纳了常见转染技术。
常用转染方法对比
Part 1
没有一种方法适用于所有的细胞和实验，这取决于细胞的类型和实验。理想的方法应具有转染效率高、细胞毒性低、对正常生理影响小、易于使用和重复性好等特点。磷酸钙法、阳离子脂质体法、病毒转染法和电穿孔法是哺乳动物细胞转染的常用方法。
阳离子脂质体
● 操作快速简单
● 结果可重复
● 转染效率高
● 转染 dna、 rna 和蛋白质
●适合生产瞬时和稳定的蛋白质
● 可用于体内转染
● 优化经济条件（某些组织细胞系对阳离子脂质体作为敏感）
● 有些企业不同细胞系不容易管理进行转染
●血清的存在干扰了复合物的形成，导致转染效率降低
●培养基中没有进行血清会增加导致细胞毒性。
病毒转染
●高转染技术效率（原代培养细胞进行转染率为80-90％）
●适用于难以转染的细胞系。
● 可用于体内转染
●可以用来构建社会性或瞬间表达的细胞系
●转染的细胞系必须含有病毒受体。
●有限的基因进行插入一个大小（病毒主要载体~10kb，非病毒作为载体~100kb）
●重组蛋白质的构建是困难和费时的
●存在生物安全问题（基本疾病的激活、免疫原性、细胞毒性、插入突变、细胞的恶性转化）
电转
● 原理简单
低条件可以在优化后产生一些重复的结果。
● 不需要载体
对细胞不同类型和条件没有进行限制
●优化经济条件后，可快速转染大量研究细胞。
● 需要特殊的设备
电电脉冲和电压参数需要优化
● 对细胞伤害很大
● 细胞死亡率高，所以需要大量的细胞。
● 会不可控制进行有效逆转地损坏导致细胞膜
磷酸钙共沉淀
● 便宜且容易获得
●适合生产瞬时和稳定的蛋白质
●高转染效率（对细胞系没有限制）
Ccapo4溶液的制备对 ph 值、温度和缓冲盐浓度敏感
● 可重复性较差
●细胞产生毒性，尤其是对原代培养细胞。
● 不能通过采用RPMI培养基，由于其含高浓度的磷酸盐
●不适合在体内转染
转染优化推荐
Part 2
转染前应进行预实验，优化转染条件。以脂质体转染条件的优化为例，转染条件的优化包括:脂质体用量、dna密度、细胞密度、脂质体与dna混合培养时间等。首先，由于不同的质粒和脂质体具有不同的最佳混合比例，因此在转染前应进行预试验，以找出最佳混合比例。根据质粒梯度:脂质体= 1:1，1:2，1:3，1:4，确定最佳转染率，如下表所示:
寻找一个最佳的转染条件发展需要进行大量的时间，而且手工操作过程中容易出错。同时，可以有效节省工作时间，保证学生实验稳定性高，减少了重复人力物力的实验研究验证。如何选择使用自动工作站优化转染条件，你可以提供参考这篇文章: 高效转染条件不断优化: 多因子平行性
转染时的细胞密度对转染效率产生影响企业非常显著。
不同的转染试剂，要求转染时的最适细胞密度各不相同，即使同一种试剂，也会因不同的细胞结构类型或应用而异。转染时过高或者过低的细胞密度会导致转染效率可以降低，乃至表达能力水平偏低。因此我们如果没有选用新的细胞系或者新的转染试剂，最好方式能够有效进行管理优化设计实验并为自己以后的实验数据建立提供一个社会稳定工作方法，包括学生适当的接种量和培养学习时间成本等等。一般转染时贴壁细胞密度为40％-80％。
在系统工程细胞系的发展过程中，我们国家需要时间关注细胞培养、转染和筛选过程中的生存能力和状态，但这类工作在开发人工智能操作时，需要考验管理者的视力、耐心和专注力，可能存在人为错误。丹纳赫人命科学旗下贝克曼库尔特人命科学的Vi-CELL BLU 细胞计数和活力分析系统可以或许全自动进行细胞活力分析与细胞计数，无需人员之手，援助用户完成标准化的细胞计数和活力分析，是生物制药行业计数和活力测试的标准分析方法之一，其软件满足21 CFR part 11，符合审计追踪的要求。
工业上广泛使用的另一种转染方法是电穿孔。如果电压太高，许多细胞会死亡。不同的电池需要不同的电压。对于大多数电池，最佳电压为250-1250v。转染细胞应处于对数生长期。对数生长期的细胞抗损伤能力最强。细胞浓度应在5x106和1x107之间。每个转染质粒应控制在4-6 μ g，10μg的转染效率会大大降低。
转染成功后需要学生通过自己建立稳转株，上一篇研究文章中（工程细胞株进行设计开发公司产品系列之表达个人信息网络系统数据分析结果对比）简单相关理论介绍了两种不同方式筛选工作学习方法：抗生素型与代谢型筛选标记。筛选后的细胞会形成mini pool，但这其中的细胞是异质化的。下一篇文章就是因为我们会讲如何从mini pool形成单克隆，并且由于没有发展形成一个能够满足我国企业申报管理能力要求的单克隆源性证明这些活动材料。